تعتبر عملية الـ Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) أحد التقنيات الحديثة والحيوية المهمة في مجال البيولوجيا الجزيئية والتشخيص الجيني. يتمثل الهدف الرئيسي لهذه التقنية في تضخيم وتحليل الحمض النووي (DNA) أو الحمض الريبي النووي (RNA)، مما يتيح اكتشاف وتحليل موجودات جينية صغيرة بدقة عالية.
تبدأ العملية بتحويل الـ RNA إلى DNA باستخدام إنزيم يُعرف بالـ reverse transcriptase، والذي يقوم بتوليف سلسلة متناظرة للـ RNA الأصلي. يُعد هذا الخطوة الأولى أساسية لأن الـ PCR يتعامل أساسًا مع الـ DNA.
ثم يتم استخدام الـ PCR لتكرار السلسلة الجديدة من الـ DNA بشكل هائل، حيث يستخدم الإنزيم المسمى بالـ DNA polymerase لنسخ السلسلة الـ DNA بشكل متكرر في دورات متعددة. يشمل الـ PCR تسخين وتبريد متكرر لفصل السلسلة الـ DNA إلى سلسلتين، ثم يتم تكرار هذه العملية لتضاعف الكمية.
تتيح هذه التقنية اكتشاف وتحليل كميات صغيرة جدًا من الـ RNA أو الـ DNA، مما يساعد في تشخيص الأمراض الجينية والفحص الجيني للاضطرابات الوراثية. يُستخدم الـ RT-PCR أيضًا في دراسة التعبير الجيني والبحوث الجزيئية، حيث يمكنها توفير نتائج دقيقة وكميات صغيرة من المواد الجينية.
تُعد تقنية الـ RT-PCR إحدى الأدوات الحيوية الرئيسية في مجال البحث العلمي والتشخيص الطبي، حيث تقدم إمكانيات فريدة في فحص الجينات بدقة وكفاءة، مما يساهم في تطوير العلاجات وتحسين فهمنا للعمليات الجزيئية داخل الخلايا.